Als enzymgekoppelter Immunadsorptionstest (EIA) bzw. Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) wird ein Nachweistest bezeichnet, der auf der Interaktion von Antigen und Antikörper sowie einer enzymatischen Farbreaktion beruht. - abiweb (abiweb)

Enzym-gekoppelter Immunoadsorptionsassay (ELISA) engl. enzyme-linked immunosorbent assay Definition Im Unterschied zum RIA wird beim ELISA ein Ligand verwendet, der nicht radioaktiv markiert, sondern an ein Enzym (z.B. eine Peroxidase) gekoppelt ist. In der Praxis wird der Antikörper gegen das nachzuweisende Antigen zunächst auf einer Mikrotiterplatte immobilisiert. Nach der Blockierung unspezifischer Bindungsstellen wird das Antigen hinzugefügt und gebunden. Im nächsten Schritt wird ein weiterer, gegen das Antigen gerichteter Antikörper hinzugegeben, der mit einem Enzym gekoppelt ist (z.B. ein anti-Maus-IgG, das mit Meerrettich-Peroxidase gekoppelt ist). Zugabe eines Substrates (z.B. o-Phenylendiamin für die Peroxidase) setzt die Enzymreaktion in Gang, bei der in den meisten Fällen ein farbloses Substrat in ein farbiges Produkt überführt wird. Die entsprechenden Produkte werden dann kolorimetrisch bestimmt. (Chemgaroo)

Häufig wird jedoch auch der kompetitive Immunassay (Enzymgekoppelter Immunadsorptionstest, EIA) angewendet. Hierbei wird zur Detektion kein zweiter, markierter Antikörper verwendet, sondern ein markiertes Kompetitor-Antigen (eine synthetische Verbindung, die dem Analyten strukturell ähnlich ist und auch am Antikörper bindet) eingesetzt. So kommt es zur Kompetition (Konkurrenz) zwischen Analyt und Kompetitor um einen Bindungsplatz am Antikörper. Das Signal verhält sich hier umgekehrt zur Analyt-Konzentration: wenig Analyt = fast alle Antikörperbindestellen werden von markiertem Kompetitor besetzt = starke Farbreaktion; viel Analyt = schwache Farbreaktion. Die verwendeten Nachweissysteme (Enzyme/Substrate) sind meist die gleichen wie beim ELISA. (Wikipedia)